Приготовление препаратов из эякулята для FISH диагностики в СПб

Что это за процедура

FISH-диагностика — это метод молекулярной цитогенетики, при котором используют флуоресцентные зонды для выявления специфических участков ДНК на хромосомах. Метод позволяет оценить хромосомный набор различных клеток, в том числе сперматозоидов. Такую диагностику могут назначать в дополнение к спермограмме.

Приготовление препаратов из эякулята для FISH-диагностики проводится в условиях современной лаборатории — это необходимо для получения достоверных и информативных результатов.

В норме сперматозоиды должны нести по одной копии всех хромосом. В некоторых случаях возникают ошибки расхождения хромосом, в результате чего отдельные хромосомы могут отсутствовать или появляться в лишних копиях. FISH-тест позволяет определить процент таких аномальных клеток в эякуляте.

Показания к проведению

FISH-диагностику проводят по назначению врача-репродуктолога или уролога при следующих состояниях:

• бесплодие неясного происхождения;
• повторяющиеся неудачные попытки экстракорпорального оплодотворения;
• выкидыши у партнерши в анамнезе.

Исследование также рекомендуют при низком количестве сперматозоидов или большом числе аномальных клеток.

Этапы оказания процедуры

Приготовление препаратов из эякулята для FISH-диагностики включает несколько этапов.

1. Получение образца

Эякулят получают в специально оборудованном помещении клиники методом мастурбации. Биоматериал собирают в стерильный контейнер и доставляют в лабораторию в течение часа.

2. Подготовка клеток

В лаборатории образец очищают от семенной плазмы специальными средами и методом центрифугирования. После очистки сперматозоиды переносят на предметное стекло и фиксируют химическими растворами. Это важно для сохранения структуры клеток.

3. Денатурация ДНК и гибридизация с зондами

Зафиксированные клетки обрабатывают высокой температурой и химическими веществами, чтобы разделить двойные спирали ДНК на нити. Затем наносят флуоресцентные ДНК-зонды — короткие последовательности, соответствующие определённым хромосомам. Стекло помещают в термостат на несколько часов для гибридизации.

4. Промывка и контрастирование

После гибридизации препарат промывают буферными растворами, чтобы удалить несвязавшиеся зонды. Специфически присоединённые зонды сохраняются. Затем ядро сперматозоида окрашивают контрастирующим раствором для лучшей визуализации.

5. Анализ под микроскопом

Препарат исследуют под флуоресцентным микроскопом. Специалист анализирует количество светящихся сигналов в ядре каждого сперматозоида и определяет процент клеток с нормальным или аномальным хромосомным набором.